Inmunocromatografía y Reacciones de Lisis: Fundamentos y Aplicaciones Diagnósticas

Inmunocromatografía

La **inmunocromatografía** se utiliza para diagnosticar la **leishmaniosis**, una enfermedad parasitaria causada por un protozoo. El proceso implica la detección de anticuerpos (Ac). Se emplea una mezcla de proteína A con el complejo oro-coloidal. La proteína A tiene la capacidad de fijar la IgG, ya sean específicas o inespecíficas. Si se une la IgG específica (del suero), se unirá al antígeno (Ag) de la leishmaniosis. Si la IgG no es específica, no se unirá a dicho Ag. Por lo tanto, en casos positivos, se producirán dos bandas: una por la unión IgG específica más Ag, y la otra por la unión del Ac-AntiproteínaA. En el caso negativo de leishmaniosis, solo habrá esta última banda.

La inmunocromatografía también se utiliza para realizar pruebas de embarazo, donde se detectan los Ag. La **gonadotropina** es una hormona que se eleva durante el embarazo. Se recomienda utilizar la primera orina de la mañana. Dentro del test de embarazo, hay una membrana de nitrocelulosa. Existe un Ac monoclonal frente a la hormona. Si la orina contiene la hormona, se une a los Ac y se desplaza por capilaridad de izquierda a derecha.

Reacciones de Lisis

Las **reacciones de lisis** se utilizan para evaluar la capacidad lítica del complemento. Los niveles de los componentes del complemento pueden estar disminuidos en casos de inmunodeficiencia. Se miden estos niveles séricos.

Capacidad Hemolítica 50

Se evalúa la **capacidad hemolítica 50** utilizando eritrocitos de carnero sensibilizados con un Ac. Se realizan diluciones en el suero, donde se encuentra el complemento, el cual se activa, produciendo la hemólisis. En el último pocillo, se observa una hemólisis total con agua destilada (Control). A medida que se diluye el suero, la capacidad hemolítica disminuye, manifestándose en menos color y la aparición de un botón en el fondo.

Dye Test (Sabin-Feldman)

El **Dye test (Sabin-Feldman)** es similar al anterior y se utiliza para la **toxoplasmosis**. Se emplean toxoplasmas, un suero positivo y otro negativo. Se inactivan por calor para romper el complemento. Luego, se adiciona una fuente de complemento. Si hay Ac frente al toxoplasma, el complemento se fijará a él (Suero positivo). Se añade azul de metileno, que teñirá los parásitos con la membrana intacta (negativo). Si no se observa color, es positivo, ya que la membrana está alterada y no ha sido teñida.

Consideraciones Adicionales

En la derecha, habrá Ac policlonales inmovilizados y colorantes sustratos de la enzima con la que se marcaban los otros Ac. En la zona de control, tenemos Ac secundarios inmovilizados para verificar si toda la muestra se ha difundido correctamente.